蛋白研究

-Luminex多因子液相芯片

Luminex® xMAP(flexible Multi-Analyte Profiling)技术又称流式荧光技术,又称液相悬浮芯片技术,该技术的核心是将直径6.5μm的微球(聚苯乙烯微球或超顺磁微球)用荧光染色的方法进行编码,通过调节红色和红外两种荧光染料的不同配比获得可达100种具有不同特征荧光谱的微球,然后将每种编码微球共价交联上针对特定检测物的抗原、抗体或核酸探针等捕获分子,当这些预包被的微球与待检样本杂交孵育时,目标物被微球捕获后,被用生物素标记的特异性检测探针或抗体混合物识别,加入链霉亲和素-PE荧光素底物(SAPE)后发光,并用Luminex®仪器进行信号读取,通过两束激光分别识别编码微球和检测微球上报告分子的荧光强度。

技术原理

技术特点

  1. 多重定量:96孔板,80个样本/板,单孔同时定量检测多达50种因子;
  2. 可测定不同类型的样本:血浆/血清、细胞培养上清、泪液、唾液等其他体液;
  3. 微量样本:无需抽提纯化蛋白,仅需25-50μL样本,特别适合稀有样本;
  4. 选择灵活:提供Pre-mix试剂或自由挑选因子组成一个自选试剂盒的两种选择;
  5. All-in-one-box:一个试剂盒中提供了实验所需要的所有试剂;
  6. 相比于传统的ELISA方法,有明显的优势,如样本用量少、通量高、耗时短等。

方法比较

以40个样本和10个蛋白因子的检测为例:

 

 

 

ELISA

 

 

Milliplex

 

通量 低,需要做10块板 高,只要一块96孔板
定量检测
样本需求量 4mL 50ul
内部质检
检测时间 3hours 10hours
动力学范围 10-2500pg/mL 1-10,000pg/mL
检测下限 ~1pg/ml ~pg/ml
实验流程 工作量大,耗时长 简化,工作量少,耗时短
成本 较高 较低

 

数据分析

 

实验流程